Микробиологический словарь

Бруцеллез - хроническое или остро-хроническое заболевание человека и животных, обусловленное бактериями рода Brucella (см.). В зависимости от вида возбудителей и их природных хозяев различают несколько близких по патогенезу, клинике, но различных по эпидемиологии и тяжести болезни форм Б.: мелкого рогатого скота (мелитензис), крупного рогатого скота (бовис), свиней, овец, собак, крыс. В патологии человека имеют значение две первые формы. Возбудители Б. проникают в организм человека с молоком, молочными продуктами, мясом, при контакте кожи и слизистых оболочек с абортированными плодами, последом, выделениями б-ных животных. Размножаются внутри лимфоидных клеток, образуя гранулемы в печени, селезенке, костном мозге, лимфатических узлах. В острой фазе возбудители обнаруживаются в крови, выделяются с мочой, молоком, вагинальным секретом, реже с испражнениями. В процессе болезни развивается сенсибилизация организма к Аг возбудителя, появляются полные и неполные Ат, к-рые могут достигать высоких титров и сохраняться длительное время после выздоровления. Для профилактики, а иногда и терапии хронических форм применяют живую вакцину из штамма В. abortus 19-BA, также вызывающую сенсибилизацию организма. Для постановки д-за используют культуральный, серол., экспериментальный и аллергический м-ды. Бруцеллы могут быть выделены непосредственно в патологическом материале, а также в объектах внешней среды с помощью прямой или непрямой РИФ. Ее используют и для идентификации выделенной к-ры, особенно контаминированной др. бактериями. К-ра бруцелл в острую фазу болезни выделяется из крови 65 - 90% б-ных овечьим Б. и 5-15% б-ных Б. крупного рогатого скота. Хорошие результаты в острой и хронической стадиях болезни дает посев пунктата костного мозга. Предлагают также делать посев мочи и пунктата лимфоузлов. Кровь для посева забирают из локтевой вены в объеме 10 -20 мл на высоте лихорадки, до назначения антибиотиков или в перерыве между их приемом и засевают по 5 - 10 мл в 2 прямоугольных флакона с МПБ и сывороточно-декстрозной средой по методу Кастаньеды (см. Гемокулътура). Пунктат костного мозга и лимфоузлов засевают по нескольку капель в 2 пробирки с теми же средами. Стерильно взятую мочу обрабатывают бруцеллезной агглютинирующей с-кой в конечном разведении 1:16, центрифугируют, осадок высевают на те же среды, добавив к ним генцианвиолет в концентрации 1:200 тыс. Один флакон (пробирку, чашку) инкубируют в аэробных условиях, др. - в среде с 10% содержанием СО2 . Посевы просматривают каждые 3 - 4 дня. Из колоний или помутневшей среды делают отсевы на скошенные плотные среды. Если в течение 5 - 6 нед. из первичной среды не удается выделить к-ру, выдают отрицательный ответ. Выделенная к-ра подвергается родовой и видовой идентификации. На принадлежность к-ры к роду Brucella (см.) указывают типичная морфология бактерий и колоний, грам- окраска, положительная РА на стекле с поливалентной бруцеллезной с-кой. Для видовой идентификации используют признаки, описанные в ст. Brucella (см.). Выделение к-р допускается в специальных лабораториях при строгом соблюдении правил техники безопасности. В с-ке б-ных Б. накапливаются агглютинирующие (вначале IgM, затем IgG), неполные блокирующие (IgA и IgG) и опсонические (IgG) at. Для их выявления с диагностической целью используют пробирочную (Райта) и пластинчатую (Хеддлсона) РА, РИГА, РИФ, опсонофагоцитарную пробу и для выявления неполных Ат - антиглобулиновую пробу Кумбса. Чаще применяют пробирочную реакцию Райта. Она проста в постановке, чувствительна, специфична, достигает диагностического титра на 2-й нед. В поздние сроки болезни, при хроническом течении число б-ных, к-рые дают положительную реакцию Райта, сокращается и приходится прибегать к др. перечисленным выше реакциям. РА проводится в пробирках в объеме 1мл с разведениями с-ки 1:50, 1:100, 1:200, 1:400, 1:800 и единым бруцеллезным диагностикумом. Последний представляет собой взвесь убитых нагреванием и фенолом бруцелл. Для пробирочной реакции диагностикум разводят в 10 раз карболизированным (0,5%) физраствором. М-ка разведения с-ки обычна для пробирочной РА. Пробирки встряхивают, ставят в термостат при 37°С до следующего дня. Учет реакции проводят обычным способом или по 50% агглютинации (2+) в сравнении со стандартом мутности. Серийные титры 50% агглютинации 1:50, 1:100, 1:200 и т.д. свидетельствуют о том, что в 1 мл иссл. с-ки содержится соответственно 50, 100, 200 ME и т.д. Ат. Выраженность реакции б-ного оценивают по следующей схеме: менее 100 ME - реакция сомнительна, 100 -200 ME - положительна, выше 200 ME - резко положительна. В условиях массового обследования на Б. применяют РА на стекле (пластинчатую Хеддлсона) в сочетании с аллергической пробой. Она специфична, достаточно чувствительна, проста в постановке и дает возможность выявлять агглютинины в первые дни болезни, быстро получать ответ. На большое (9x12 см) хорошо обезжиренное сухое стекло на расстоянии 3 - 4 см друг от друга микропипеткой наносят иссл. с-ку в дозах 0,04, 0,02, 0,01 мл (опытные капли) и 0,02 мл (контрольная капля). К трем первым каплям с-ки добавляют по 0,03 мл единого неразведенного диагностикума, к последней - 0,03 мл физраствора. Готовят контроль Аг - 0,03 мл Аг и 0,03 мл физраствора. С-ку и Аг смешивают осторожным покачиванием или с помощью стеклянной палочки, слегка подогревают стекло над пламенем горелки. При положительной реакции в опытных каплях появляются хлопья и жидкость становится более или менее прозрачной. Максимальный срок наблюдения - 8 мин. Учет осуществляют невооруженным глазом по 4+ системе. Агглютинацию во всех трех дозах на 4+ принимают за резко положительный результат, в первой и второй дозах - за положительный результат, только в первой дозе - за сомнительный, отсутствие агглютинации во всех дозах - за отрицательный результат. Предложена РПГА с эритроцитарным диагностикумом. Диагностический титр РПГА 1:100 и выше. В случае отрицательной реакции Райта, особенно при подострых и хронических формах Б., ставят реакцию Кумбса (см. Кумбса реакция) для определения блокирующих Ат, присутствие к-рых возможно в титрах в 2 -8 раз более высоких, чем агглютининов. Для д-ки Б. предложена также опсонофагоцитарная реакция, к-рую вследствие вариабельности результатов и трудоемкости постановки и учета используют редко. Аллергический м-д применяют для оценки состояния сенсибилизации (ГЗТ) к бруцеллам, наблюдающегося у б-ных Б., инфицированных бруцеллами лиц и привитых живой бруцеллезной вакциной (между 2 - 13 мес. после вакцинации) людей. Пробу (по Бюрне) ставят путем введения туберкулиновым шприцем 0,1 мл бруцеллина (см.) внутрь кожи ладонной поверхности предплечья. У сенсибилизированных людей реакция возникает спустя 6 -8 ч после введения аллергена, достигает максимума к 24, иногда 48 ч, проявляется в образовании отечного инфильтрата Реакцию учитывают через 24 ч путем осмотра и ощупывания места введения бруцеллина, а также путем замера параметров инфильтрата. За положительную реакцию принимают инфильтрат размерами больше 2x3 см. Его отсутствие, меньшие размеры или позднее появление, а также отек принимают за отрицательную реакцию. Как отрицательный результат расценивают также рано появившийся (до 6 ч) и быстро исчезнувший отек. Диагностическая ценность аллергического м-да снижается из-за того, что сенсибилизация к бруцеллину часто наблюдается у инфицированных бруцеллами и выздоровевших от бруцеллеза лиц.

Бруцеллерген - нуклеопротеидный экстракт бруцелл. Используют для внутрикожной пробы в целях выявления сенсибилизации к аллергенам бруцелл.

Бруцеллин - фильтрат 3-дневной убитой нагреванием бульонной к-ры бруцелл. Представляет собой прозрачную светло-желтую жидкость. Хранится при +4°С в сухом помещении. Применяют для аллергической д-ки бруцеллеза.