Микробиологический словарь

Поплавки - небольшие стеклянные пробирочки размером 20 - 40x5 мм. Помещаются в жидкие углеводные среды открытым концом вниз для улавливания газа, образующегося в результате ферментации Сахаров некоторыми бактериями. Учитывают только те случаи, когда газом заполнен значительный объем поплавка. Пузырьки газа в поплавке могут появиться при переносе питательной среды из холодильника или из помещения с комнатной температурой в термостат, вследствие меньшей растворимости воздуха в жидкой среде при более высокой температуре.

Популяции микроорганизмов - совокупность особей одного вида, относительно длительно обитающих на определенной территории (в биотопе). В связи с неоднозначным пониманием или невозможностью строгого разграничения границ обитания П., а также характером изоляции и фенотипической изменчивости понятие П. иерархично: от относительно небольших групп клонов, к-рые часто обозначают специальным термином «микропопуляция», или «дем», до очень крупных популяционных систем. П.м., так же как растений, животных, гетерогенны, полиморфны, т.е. состоят из смеси особей, клонов, вариантов, отличающихся по большему или меньшему числу признаков. Гетерогенность П. определяет ее приспособленность к различным условиям обитания и создает важный для эволюции резерв наследственной изменчивости. Положение отдельных клонов и варов микроба в П. неодинаково: одни занимают в ней доминирующее положение, др. - субдоминирующее, третьи - минорное, низкочастотное. Структура П.м. динамична во времени. В ней могут происходить количественные и качественные сдвиги, связанные с внутривидовой конкуренцией и изменением условий обитания. В результате этого доминантные штаммы, вары становятся минорными, в структуре П. появляются новые варианты и исчезают исходные. Возникновение новых штаммов и вариантов в П.м. обусловлено миграцией особей из соседних П., а также фенотипической или генотипической изменчивостью особей, входящих в состав этой П. Степень гетерогенности П.м., скорость и степень изменений в ее структуре зависят от вида микроба, изолированности П. от др. П., давления факторов отбора. Напр., П. открытых патологических процессов более гетерогенны и изменчивы по сравнению с таковыми закрытых процессов. П. у б-ных, находящихся в стационаре, более гетерогенны, чем у негоспитализированных б-ных. См. также Полиморфизм микроорганизмов, Изменчивость популяционная.

Посевы бактериологические - нанесение (внесение) петлей, пипеткой или др. инструментом содержащего бактерии материала на (в) питательные среды в целях выделения чистой к-ры, ее накопления, хранения, а также определения количества и многообразных св-в (см. Бактериологический метод). П. б. должны проводиться таким образом, чтобы достигнуть поставленной цели (напр., получения изолированных колоний) и в то же время предупредить контаминацию посевного материала и питательных сред микробами окружающей среды, а также заражение людей и контаминацию окружающих объектов микробами, находящимися в посевном материале. П.б. проводят в спецодежде, в специальных боксах и лабораториях, содержащих минимальное число микробов, около пламени горелки, стерильными инструментами, в стерильные среды и при строгом соблюдении др. условий асептики. В зависимости от целей и посевного материала П.б. делают на плотные или жидкие среды, чашки Петри, пробирки, колбы, матрацы, ферментеры и др. Техника посева на чашки Петри бактериол. петлей: петлю прокаливают на пламени, охлаждают, берут каплю посевного материала, левой рукой приоткрывают один край чашки, вносят внутрь ее петлю, около одного из краев круговыми движениями петли делают площадку и засевают материал на всю поверхность среды параллельными штрихами с интервалом 4 - 5 мм. Если в материале находится большое количество микробов, то материал аналогичным образом засевают на половине чашки, затем петлю прожигают, чашку поворачивают на 90° и на оставшейся части среды проводят перпендикулярные штрихи петлей, захватывая часть предыдущего посева. Еще один вариант посева петлей заключается в том, что чашку со средой мысленно делят на 4 - 5 радиальных секторов и одной и той же петлей поочередно делают посевы на всех секторах. Техника посева шпателем: берут 3 чашки с плотной средой. На середину первой петлей или пипеткой вносят каплю посевного материала и круговыми движениями шпателя или чашки производят сплошной посев Этим же шпателем, не стерилизуя его, распределяют материал по второй и третьей чашкам. Методика позволяет получить изолированные колонии, но менее экономична, чем остальные. Техника посева тампоном: первоначально тампоном, поворачивая его разными сторонами, проводят на чашке со средой диагональную дорожку шириной 1-2 см, затем штрихами петли через дорожку засевают среду по обе ее стороны. Во втором варианте один из радиальных секторов чашки засевают тампоном, а затем поочередно остальные секторы - петлей с заходом каждый раз на уже обработанную тампоном поверхность. Техника посева штампом-репликатором: в лунки основания штампа-репликатора пипеткой наливают по 0,1 мл бульонных или смывов агаровых к-р. Крышку штампа накладывают на основание таким образом, чтобы штыри окунулись в лунки с к-рой, после чего делают отпечатки (реплики) на поверхности плотной среды одной или нескольких чашек. При такой методике на одной чашке может быть испытано на чувствительность к антибиотикам, ферментацию Сахаров или др. св-ва одновременно 25 - 50 к-р. На отпечатках вырастают однородные по величине и форме участки роста. Техника посева бляшкой: при определении некоторых св-в иссл. к-р бактерий (гемолиз, токсигенность, лецитиназная активность и др.) на плотных средах производят плотный посев на ограниченном участке среды в виде прямоугольника, овала, круга размерами 0,5 - 0,8x1 - 1,5 см. Между бляшками следует выдерживать расстояние в несколько см (в зависимости от теста). Техника посева сплошным газоном: стерильной пипеткой в чашку со средой вносят 1 мл 1 - 2-миллиардной к-ры, осторожными круговыми движениями чашки покрывают к-рой всю без исключения поверхность среды, чашку слегка наклоняют и пипеткой отсасывают остатки к-ры. Полученный сплошной газон подсушивают и используют для тех или иных целей, напр. для нанесения типовых фагов. Техника посева в пробирки со скошенной средой: прямой посев иссл. материала на скошенную среду делают редко, напр., при выделении микобактерий. Чаще на скошенные среды переносят к-ру из др. пробирки или с колоний на чашках. Для этого обе пробирки держат в левой руке (пробирка с засеянной средой находится ближе к туловищу лаборанта) в наклонном положении между большим и указательным пальцами так, чтобы поверхность среды можно было наблюдать. Петля - в правой руке. Пробки обеих пробирок вынимают, зажимая их между мизинцем и ладонью (гипотенором). В таком положении они остаются до конца посева. Края пробирок обжигают, петлю прокаливают, охлаждают о стенку пробирки, слегка прикасаются ею к росту к-ры на поверхности питательной среды, переносят петлю, не прикасаясь к стенкам, во вторую пробирку и делают сплошной штриховой посев. Петлю прокаливают, ставят в штатив, края пробирок прокаливают и закрывают пробками. Техника посева в конденсационную воду: выбирают свежескошенную среду, содержащую на дне каплю конденсационной жидкости. Иссл. к-ру забирают петлей, открывают пробку, обжигают края пробирки и петлю, осторожно, не касаясь среды и стенок, вносят в конденсационную воду. У выражение подвижных к-р рост бактерий с конденсационной воды распространяется на влажную поверхность косяка. С верхней части роста бактерий производят пересев в конденсационную воду второй пробирки и т.д. Методика позволяет получить чистую к-ру подвижных бактерий, напр., протея (способ Шукевича), возбудителя столбняка (способ Файлдса). Техника посева в верхнюю часть скошенной среды: материал или к-ру с соблюдением всех указанных выше технических приемов наносят в виде бляшки на верхнюю часть свежескошенной среды. Пробирки помещают в термостат в вертикальном положении и наблюдают за сползанием к-ры вниз по поверхности скошенной части, к-рое характерно для слизистых штаммов. Техника посева в толщу плотной среды: к 15 -20 мл расплавленной и охлажденной до 48°С плотной питательной среды Добавляют 1 мл иссл. материала или иссл. к-ры (одно или несколько разведении в зависимости от цели). К-ру и среду смешивают энергичными круговыми движениями флакона, выливают в стерильную чашку, распределяют ровным слоем по всей поверхности, дают затвердеть на ровной горизонтальной поверхности и помещают в термостат. Колонии вырастают в толще и на поверхности среды и, если среда прозрачная, могут быть легко подсчитаны. Таким же образом посев может быть произведен в толщу столбика плотной среды в Пробирке. Техника посева уколом в столбик плотной или полужидкой среды: используют высокий столбик плотной среды, напр., при культивировании анаэробов; столбик полужидкой питательной среды, напр., при изучении сахаролитических св-в на полужидких средах; полускошенные плотные среды, напр., при накоплении и предварительной идентификации выделенной к-ры в трехсахарном агаре. Во всех случаях бактер. петлей или нтлой с посевным материалом делают прокол среды с поверхности до дна. Пробирку реко-м ендуют держать дном вверх, чтобы не наступала контаминация среды воздушной микрофлорой. Посев в жидкие среды в пробирках или флаконах производят обычно стерильным и пастеровскими или градуированными пипетками. В пробирки материал можно засевать и бактер. петлей.

Посуда лабораторная. В бактериол. лабораториях используют цилиндры, колбы, склянки, бутыли, матрацы, пробирки бактериол., центрифужные, агглютинационные, преципитационные, чашки Петри, пипетки градуированные и пастеровские. П.л. должна быть изготовлена из прозрачного бесцветного невыщелачивающегося термостойкого стекла. Перед применением П.л. необходимо вымыть и простервлизовать. Ее моют ершами или в машине с мыльно-содовым р-ром или р-ром порошка типа «Биолот», «Лотос», «Айна», «Астра» (не обладающим антимикробной активностью) с перекисью водорода или без нее. Чистую посуду промывают проточной водой, сушат в сушильном шкафу, закрывают, заворачивают в плотную бумагу и стерилизуют в аэростериле при 160 - 180°С в течение 45 - 60 мин или в автоклаве при 120°С в течение 20 - 30 мин. В последнее время в лабораториях широкое применение нашла пластмассовая посуда одно- и многократного использования.