Микробиологический словарь

Бактериоцины (биоцины) - белковые антибиотикоподобные вещества бактер. происхождения, подавляющие размножение особей гомологичного и близких видов. Синтез Б. носит индуктивный или конститутивный характер и контролируется специальным типом автономных плазмид, обозначаемых Col-факторами. При слиянии с половым фактором или умеренным фагом они могут включаться в хромосому бактерий. Бактерии, содержащие Col-фактор, называются бактериоциногенными, а само явление носительства таких факторов - бактериоциногенией. Б. гетерогенны по спектру и способу действия, по хим. структуре и м.м., по антигенной специфичности. Механизм действия Б. состоит в ингибиции отдельных этапов синтеза макромолекул, к-рая наступает после адсорбции Б. на специальных рецепторах клеточной стенки чувствительных бактерий. Утрата рецепторов или репрессия их синтеза приводит к развитию устойчивости к действию соответствующих Б. Обозначают Б. по виду и роду бактерий, к-рые их синтезируют. Напр., Б., синтезируемые кишечной палочкой, называют колицинами, стафилококками - стафилоцинами и т.д. Бактериоциногения - один из механизмов внутри- и межвидовой конкуренции бактерий. Так, бактериоциногенные штаммы нормальной микрофлоры участвуют в элиминации заносных патогенных и непатогенных микробов с кожи и слизистых оболочек животных, включая человека.

Бактерицидная активность кожи - св-во кожи человека и животных вызывать гибель попадающих или нанесенных на нее бактерий. Б. а. к. связывают главным образом с действием молочной и жирных к-т, выделяемых потовыми и сальными железами. Она присуща живой коже и может меняться при различных патологических процессах, отражая в известной степени состояние естественного иммунитета. Для определения Б. а. к. используют методику, предложенную Н.Н.Клемпарской (1959). Ход исследования: на кожу передней поверхности предплечья испытуемого стерильным тампоном наносят суточную бульонную к-ру кишечной палочки, разведенную в 5x104 раза. Сразу после нанесения, а также через 5, 10 и 15 мин с разных участков контаминированной кожи делают отпечатки на стекла, покрытые тонким слоем среды Эндо или МПА. Стекла выдерживают во влажной камере в термостате при 37°С сутки, подсчитывают на них число колоний красного цвета и делают перерасчет на 1 см2 поверхности. Б.а.к. выражают в виде индекса бактерицидности (ИБ) по формуле: ИБ = (К1 - К2)/К1 х 100%, где К1 - количество колоний на 1 см2 поверхности кожи соответственно сразу после нанесения к-ры и К2 - через 15 мин после нанесения бактерий. ИБ кожи здоровых людей составляет 90-100%. Более прост и экономичен предложенный А.П.Красильниковым и Л.П.Титовым способ реплик, к-рый отличается от описанного тем, что высев с контаминированной поверхности кожи проводят сразу и через 15 мин стерильным 50-штифтовым репликатором.

Бактерицидная активность сыворотки крови (БАС) - св-во свежей с-ки крови вызывать гибель проникших или внесенных в нее бактерий. Обусловливается раздельным или совокупным действием Ат, С, лизоцима, b-лизина и др. менее идентифицированных факторов. Изучение соотносительного значения перечисленных факторов показало, что инактивация С существенным образом снижает БАС, добавление Ат резко повышает ее, отсутствие лизоцима и (3-лизина приводит к более или менее выраженному снижению БАС в зависимости от чувствительности к ним бактерий. Механизм кооперативного действия представляется так: система Ат -С разрушает и клеточную стенку,и цитоплазматическую мембрану; лизоцим - пептидогликан клеточной стенки; р-лизин - цитоплазматическую мембрану. Уровень БАС является интегральным показателем антимикробных св-в с-ки крови. Падение его указывает на глубокие нарушения в иммунитете и служит неблагоприятным прогностическим признаком, повышение уровня БАС оценивается положительно. При существующих м-дах определения БАС в качестве объекта обычно используют не возбудителя 6-ни, а штаммы кишечной палочки, относительно устойчивые к лизоциму. В результате они отражают главным образом уровень С и нормальных Ат против тест-микроба. Тем не менее БАС - самостоятельный показатель активности естественного иммунитета, т.к. прямой связи между БАС и активностью С нет. При практическом использовании также следует иметь в виду, что показатель БАС колеблется в зависимости от пола, возраста, времени года и др. факторов. Для определения БАС существуют две группы методик. Методики первой группы основаны на нефелометрическом установлении степени задержки роста стандартной бактер. суспензии под влиянием бактерицидных факторов иссл. с-ки по отношению к контролю, содержащему бактер. взвесь без с-ки. Среди этой группы чаще используют методику О.В.Смирновой и Т.А.Кузьминой (1966). Для ее выполнения берут 2 пробирки с 4,5 мл МПБ, в одну (опытную) добавляют каплю суточной бульонной к-ры кишечной палочки и 1 мл свежей нативной иссл. с-ки, в другую - каплю к-ры без с-ки. После перемешивания из обеих пробирок отливают по 2 мл взвеси и замеряют оптическую плотность (ДО, и ДК,) на ФЭК-Н с зеленым светофильтром №10. В контрольном кювете ФЭК должна быть дис-тил. вода. Пробирки с оставшейся смесью инкубируют при 37°С 3 ч и повторно замеряют оптическую плотность (ДО2, ДК2). БАС рассчитывают в процентах угнетения размножения к-ры по формуле: % БАС = 100 - (ДО2 - ДО1)/(ДК2 - ДК2) х 100. О.В.Бухарин и А.П.Луда (1972) предложили вариант описанной методики с расчетом показателей БАС при помощи таблиц и меньшего объема с-ки. Методика второй группы основана на установлении количества выживших бактерий после воздействия свежей иссл с-кой. В одном варианте определяют титр с-ки крови, задерживающий размножение стандартного количества бактерий, в другом - вычисляют отношение КОЕ контроля к КОЕ опыта и выражают его в виде десятичного логарифма, называемого бактерицидным индексом (БИ). В практике чаще используют второй вариант в методике Karolcek с соавт. (1959). Для установления БАС по этому способу в стерильные пробирки вносят по 0,4 мл неразведенных иссл. с-к крови и добавляют к ним 0,1 мл суточной бульонной к-ры штамма кишечной палочки № 675 плотностью 250 млн м.т./ мл. В контрольную пробирку вместо с-ки доливают 0,4 мл физраствора с 0,1% желатины. Пробирки выдерживают на водяной бане при 37°С 2 ч, после чего готовят разведения: из опытных пробирок - 10-1 и 10-2, из контрольной - 10-1, 10-2, 10-3, 10-4 и 10-5. Микропипеткой высевают по 0,1 мл на чашки с МПА из опытных пробирок цельную и разведенную в 10 и 100 раз смесь, из контроля - разведения 10-3, 10-4, 10-5. К-ру распределяют по чашке с помощью стеклянных бус. Посевы инкубируют при 37°С сутки, после чего подсчитывают число КОЕ в 1 мл опытных и контрольных проб. БАС выражают либо бактерицидным индексом (БИ) - частное от логарифма количества бактерий в опыте (lg No) к количеству бактерий в контроле (lg Nk), либо в процентах по формуле: % БАС = 100 - No/Nk х 100. Между уровнем БАС и показателем БИ имеется прямая связь, между уровнем БАС и % БАС - обратная. В методике А.П.Красильникова и Л.П.Титова (1981) способы приготовления смеси с-ки и бактерий, разведении из смесей после их инкубации, время и условия инкубации аналогичны описанным выше. Высев проводится с помощью 50-штифтового штампа-репликатора, учет роста - по наиболее вероятному числу выживших бактерий (НВЧ). Для этого разведения смеси переливают в лунки основания штампа-репликатора, штыри крышки репликатора окунают в смесь, находящуюся в лунках, и делают посев-отпечаток на 5 чашек с МПА. После суточной инкубации при 37°С учитывают количество отпечатков с ростом тест-микроба для каждого разведения на всех 5 чашках и по таблицам Тейлора (1962) находят НВЧ бактерий, содержащихся в 0,003 мл (объем, засеваемый штифтом репликатора) наиболее концентрированной из взятых разведении смеси. Бактерицидный эффект выражают либо в БИ, либо в процентах активности (см. выше).

Бактерицидный (-ая) - термин, указывающий на св-во хим. (дезинфектантов, антисептиков, химиотерапевтических веществ, включая антибиотики), биол. (Ат, С, лизоцима, р-лизина, бактериоцинов, фагов, фагоцитов) и физ. (УФЛ, ионизирующего излучения и др.) факторов вызывать гибель вегетативных форм бактерий. Аналогичный эффект указанных факторов в отношении спор называют спороцидным, микробов - микробоцидным, грибов - фунгицидным, вирусов - вирусоцидным, простейших - паразитоцидным.